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CN:31-1600/Q
ISSN:1004-0374
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《生命科学》 2015, 27(12): 1489-1493
“人造精子”与CRISPR-Cas9
钟翠青*,李劲松
(中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海 200031)
编者按:小鼠单倍体胚胎干细胞系的建立为遗传学的正反向筛选提供了一种简便而又有效的工具。除此之外,孤雄单倍体胚胎干细胞能替代精子使卵母细胞“受精”这一特性,更是实现了从细胞水平向动物水平的完美转变。无论是从制备多基因遗传操作动物模型的角度,还
    是在小鼠个体水平遗传筛选的层面,孤雄单倍体胚胎干细胞的出现都将为基因功能学研究带来新的生命力。然而,孤雄单倍体的“受精”能力极其有限,其产生健康半克隆小鼠的效率仅约2%,这也成为孤雄单倍体在个体水平广泛应用所面临并且亟需突破的一大瓶颈。通过正
    反面的实验验证,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所李劲松课题组发现,雄性印记区域H19-DMR 和IG-DMR的异常去甲基化是半克隆小鼠发育异常的“祸根”。通过敲除这两个DMR,成功将半克隆小鼠的出生效率提高至20%,为利用孤雄单倍体
    获得多基因遗传操作动物模型提供了最根本有力的保障。最后,结合CRISPR-Cas9 技术,他们创建了孤雄单倍体的sgRNA 文库,并成功将此“细胞文库”转化成携带基因突变的“小鼠文库”,由此创建了“个体水平”遗传筛选的新方法、新思路。
 
 
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